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蔗糖磷酸化酶(SP)試劑盒說明書 技術(shù)文章

更新時(shí)間:2019-06-06  |  點(diǎn)擊率:1734
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蔗糖磷酸化酶(Sucrose Phosphorylase,SP)試劑盒

商品貨號:QS2508
英文名稱:Sucrose Phosphorylase (SP) Assay Kit
別名:蔗糖磷酸化酶試劑盒 蔗糖磷酸化酶測試盒
檢測方法:常量法

 

商品貨號:商品品牌:規(guī)格基本售價(jià)選擇規(guī)格
QS2508-50管/48樣索橋生物50管/48樣¥1600.00元 

 

  • 產(chǎn)品詳細(xì)介紹

 

測定意義:

SP(EC2.4.1.7)主要存在于微生物和植物中,裂解葡萄糖苷鍵,催化葡萄糖基轉(zhuǎn)移到果糖、木糖、半乳糖和鼠李糖等,合成相應(yīng)的葡萄糖基低聚糖。此外,SP還能催化氫醌合成熊果苷,具有*的美白效果,在化妝品工業(yè)中具有重要應(yīng)用。

測定原理:

SP能夠以磷酸為受體,催化蔗糖產(chǎn)生1-磷酸葡萄糖,在葡萄糖磷酸變位酶催化下變位為6-磷酸葡萄糖,在6-磷酸葡萄糖脫氫酶作用下還原NADP+生成NADPH,導(dǎo)致340nm光吸收值增加。測定340nm吸光度增加速率,即可計(jì)算SP活性。

 

 

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  • 產(chǎn)品說明書
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貨號:QS2508                                              規(guī)格:50 管/48 樣

 

蔗糖磷酸化酶(Sucrose Phosphorylase,SP)試劑盒說明書 紫外分光光度法

 

注意:正式測定之前選擇 2-3 個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測定。

測定意義: SP(EC2.4.1.7)主要存在于微生物和植物中,裂解葡萄糖苷鍵,催化葡萄糖基轉(zhuǎn)移到果糖、 木糖、

半乳糖和鼠李糖等,合成相應(yīng)的葡萄糖基低聚糖。此外,SP 還能催化氫醌合成熊果苷, 具有*的美白效果,在化妝品工業(yè)中具有重要應(yīng)用。

測定原理:

SP 能夠以磷酸為受體,催化蔗糖產(chǎn)生 1-磷酸葡萄糖,在葡萄糖磷酸變位酶催化下變位為 6-磷酸葡萄糖,在 6-磷酸葡萄糖脫氫酶作用下還原 NADP+生成 NADPH,導(dǎo)致 340nm 光吸收值增 加。測定 340nm 吸光度增加速率,即可計(jì)算 SP 活性。

自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器: 天平、低溫離心機(jī)、恒溫水浴鍋、紫外分光光度計(jì)、1 mL 石英比色皿和蒸餾水。

試劑組成和配制:

提取液:液體 50mL×1 瓶,4℃保存。 緩沖液:液體 40mL×1 瓶,4℃保存。

試劑一:液體 25mL×1 瓶,4℃保存。

試劑二:液體 2mL×1 支,4℃保存。

試劑三:液體 1mL×1 支,4℃保存。

試劑四:粉劑×1 瓶,-20℃避光保存,臨用前加 5mL 雙蒸水溶解。

試劑五:粉劑×1 瓶,-20℃避光保存,臨用前加 5mL 雙蒸水溶解。

試劑六:粉劑×1 瓶,-20℃避光保存,臨用前加 10mL 雙蒸水溶解。

試劑七:粉劑×1 瓶,-20℃避光保存,臨用前加 10mL 雙蒸水溶解。

粗酶液提取:

1. 組織:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g 組織,加 入 1mL 提取液)進(jìn)行冰浴勻漿,然后 10000g,4℃,離心 10min,取上清待測。

2. 細(xì)菌、真菌:按照細(xì)胞數(shù)量(104個):提取液體積(mL)為 500~1000:1 的比例(建議 500 萬細(xì)胞加入 1mL 提取液),冰浴超聲波破碎細(xì)胞(功率 300w,超聲 3 秒,間隔 7 秒,總時(shí) 間 3min);然后 10000g,4℃,離心 10min,取上清置于冰上待測。

測定操作表:

             對照管    測定管

緩沖液(μ L)    850      650

試劑一(μ L)    500      500

試劑二(μ L)    30       30

試劑三(μ L)    20       20

試劑四(μ L)    100      100

試劑五(μ L)    100      100

試劑六(μ L)    200      200

試劑七(μ L)    200      200

混勻,37℃水浴預(yù)熱 5min

樣本(μ L)              200

迅速混勻,于 1mL 石英比色皿,對照管調(diào)零,測定 340nm 的初始值 A1,測定完立 即放入 37℃水浴準(zhǔn)確反應(yīng) 2min,迅速測定 340nm 吸光值 A2,△A= A2- A1。

SP 活性計(jì)算公式:

1. 按照蛋白濃度計(jì)算

酶活定義:37℃,pH6.8 時(shí),每毫克蛋白質(zhì)每分鐘催化產(chǎn)生 1nmol NADPH 為一個酶活單位。

SP 活性(nmol/min/mg prot)= △A / (s × d) ×V 反總÷V 樣÷Cpr÷T=804×△A÷Cpr

2. 按照樣本質(zhì)量計(jì)算 酶活定義:37℃,pH6.8 時(shí),每克樣本每分鐘催化產(chǎn)生 1nmol NADPH 為一個酶活單位。

SP 活性(nmol/min/g 鮮重)= △A / (s × d)  ×V 反總÷(V 樣÷V 樣總×W)÷T=804×△A÷W

3. 按照細(xì)胞數(shù)量計(jì)算

酶活定義:37℃,pH6.8 時(shí),每 104個細(xì)胞每分鐘催化產(chǎn)生 1nmol NADPH 為一個酶活單位。

SP 活性(nmol/min/104 cell)= △A / (s × d)  ×V 反總÷(V 樣÷V 樣總×細(xì)胞數(shù)量(萬個))÷T=804× △A÷細(xì)胞數(shù)量(萬個)

s:NADPH 摩爾消光系數(shù),6220 L/mol/cm;d:比色皿光徑,1cm;V 反總:反應(yīng)體系總體積, 2mL;V 樣:反應(yīng)體系中樣本體積,0.2mL;W:樣本質(zhì)量,g;Cpr:蛋白濃度,mg/mL;T:反 應(yīng)時(shí)間,2min

注意事項(xiàng):

1. 粉劑-20℃保存,配制好的試劑 3 天內(nèi)使用完。

2. 可選用 BCA 法測定蛋白含量試劑盒測定蛋白含量。

 

系列產(chǎn)品及單價(jià)

輔酶Ⅱ系列    
QS1100輔酶ⅡNADP(H)含量測試盒可見分光光度法50管/24樣550
MS1100輔酶ⅡNADP(H)含量測試盒微量法100管/48樣1000
QS1101NADP磷酸酶(NADPase)測試盒可見分光光度法50管/48樣520
MS1101NADP磷酸酶(NADPase)測試盒微量法100管/96樣980
QS11026-磷酸葡萄糖脫氫酶(G6PDH)/葡萄糖-6-磷酸脫氫酶測試盒紫外分光光度法50管/48樣160
MS11026-磷酸葡萄糖脫氫酶(G6PDH)/葡萄糖-6-磷酸脫氫酶測試盒微量法100管/96樣300
QS1103胞漿異檸檬酸脫氫酶(ICDHc)測試盒紫外分光光度法50管/48樣260
MS1103胞漿異檸檬酸脫氫酶(ICDHc)測試盒微量法100管/96樣500
QS1104NADP蘋果酸酶(NADP-ME)測試盒紫外分光光度法50管/48樣320
MS1104NADP蘋果酸酶(NADP-ME)測試盒微量法100管/96樣600
QS1105NAD-蘋果酸酶(NAD-ME)測試盒紫外分光光度法50管/48樣350
MS1105NAD-蘋果酸酶(NAD-ME)測試盒微量法100管/96樣650
QS11066-磷酸葡糖糖酸脫氫酶(6PGDH)測試盒紫外分光光度法50管/48樣750
MS11066-磷酸葡萄糖酸脫氫酶(6PGDH)測試盒微量法100管/96樣1400
QS1107肌酸激酶(CK)測試盒紫外分光光度法50管/48樣820
MS1107肌酸激酶(CK)測試盒微量法100管/96樣1500
QS1108-10脂肪酸合成酶(FAS)測試盒紫外分光光度法10管/9樣1200
QS1108-25脂肪酸合成酶(FAS)測試盒紫外分光光度法25管/24樣2000
QS1108-50脂肪酸合成酶(FAS)測試盒紫外分光光度法50管/48樣3200
MS1108脂肪酸合成酶(FAS)測試盒微量法100管/96樣6000
QS2508蔗糖磷酸化酶(SP)測試盒紫外分光光度法50管/48樣1600
MS2508蔗糖磷酸化酶(SP)測試盒微量法100管/96樣3000
QS1110硫氧還蛋白氧化還原酶(TrxR)測試盒可見分光光度法50管/48樣250
MS1110硫氧還蛋白氧化還原酶(TrxR)測試盒微量法100管/96樣450
QS1111谷胱甘肽還原酶(GR)測試盒紫外分光光度法50管/48樣260
MS1111谷胱甘肽還原酶(GR)測試盒微量法100管/96樣500

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